长期以来,细胞生物分子的可视化一直依赖于荧光探针。这样的显像剂可以通过多种方法附加到靶点上,包括生物正交化学报告策略。在这种方法中,生物分子通过探针代谢配备了一个独特的化学手柄。在随后的步骤中,采用化学方法(即生物正交)将荧光团共价连接。这种反应通常需要额外的探针来提高标记率。然而,未反应的荧光团必须在成像前移除,以避免背景信号。染料去除在某些应用中是具有挑战性的,并妨碍了对动态细胞事件的观察。荧光生物正交反应为细胞特征可视化提供了一种更方便的手段。在这些转变中,非荧光报告基团仅在与互补试剂反应时“发光”。检测探头可以过量使用来驱动反应,无需去除游离试剂。这种免洗反应对活细胞成像和相关应用很有吸引力。种荧光生物正交化学已被开发用于体外标记,但只有少数可以应用于活细胞。细胞应用需要快速和精细的生物兼容反应与稳健的荧光增强。最流行的荧光生物正交转化包括一种单一反应类型:应变二亲烯(例如环烯和TCO)和缺电子二烯(例如1,2,4,5-四嗪和Tz)的Diels?Alder(IEDDA)环加成。这些连接是快速的,细胞兼容的,可以实时照亮生物分子。然而,由于交叉反应性问题,现有的荧光IEDDA反应物不能同时使用。与其他生物正交试剂的多路复用也因其速度慢和信号开关差而变得复杂。因此,细胞多目标的实时成像仍然具有挑战性。可视化动态多组分过程需要具有独特反应特性的生物相容性荧光基序。
成果简介美国加州大学分子生物学与生物化学研究所副教授JenniferA.Prescher在J.Am.Chem.Soc.上发表了题为“FluorogenicCyclopropenonesforMulti
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