知识目标◎了解果树无病毒苗培育和组织培养的过程。技能目标◎掌握苹果中间砧育苗方法。德育目标◎培养学生职业技能。一、无病毒苗生产“无病毒苗”是利用特殊方法脱除了一些对果树生长结果影响较大的主要病毒的苗木，并非真正的无毒苗，习惯上称这样的苗木为无病毒苗。无病毒苗木生长势强，抗性较强，产量高。利用无病毒苗木是今后果树栽培发展的方向。培育无病毒苗木，需建立一整套严格的无病毒苗木繁育体系：原种圃—采穗圃—专业苗圃。（一）原种圃原种圃的任务是培育、引进无病毒原种，保存原种，并定期（3～5年）对采穗圃进行病毒检测。同时，向采穗圃提供无病毒母本树（包括品种和砧木）。（二）采穗圃采穗圃的任务是向各专业苗圃提供无病毒品种接穗、砧木种子或砧木苗。（三）专业苗圃专业苗圃的任务是生产无毒苗木。所用繁殖材料来源是采穗圃。注意事项：苗圃用具要严格消毒；原种圃、采穗圃、专业苗圃与普通苗圃或果园要间隔开。不允许任何单位或个人私自繁育无病毒苗木。二、组织培养（一）概念通过无菌操作，将植物的器官、组织或细胞接种于人工配制的培养基上，在一定的温度和光照条件下，使之生长发育为完整植株的方法，称为组织培养。用于组织培养的材料（器官、愈伤组织、细胞、原生质体或胚体），称为外植体。（二）组织培养的过程1.配制营养基营养基是制约组织培养成败的关键。不同树种、不同来源的外植体以及不同的培养阶段，适宜培养基的类型或种类均不同。目前，应用较多的培养基类型为MS培养基。2.起始培养（初代培养）采集一定的外植体，通过无菌操作过程将其移植到配置好的培养基上，这一过程称为起始培养。3.继代培养进行起始培养的外植体分化的丛生芽生长30～50天后，要转换新鲜培养基。同时，将丛生芽切割分苗，进行扩大繁殖的方法为继代培养。这一步是实现快速繁殖的关键。4.生根培养继代培养30天左右后，切取其中粗壮新梢，长度2cm左右，接种在生根培养基上，诱导生根。（三）组培苗的驯化及移栽1.苗木驯化组培苗木生根后，要进行移栽露地前的驯化锻炼，以提高移栽成活率。这种驯化主要是指培养瓶内的驯化。2.苗木移栽苗木驯化一定时间后，将苗木移栽到营养钵中。首先放于温室或塑料大棚内，开始时保持较高的相对湿度（85%～%）和适宜的温度。经一定适应期后，参照葡萄营养袋育苗的炼苗方法，逐渐将苗木移植到露地。三、苹果中间砧育苗技术苹果矮化栽培一般有矮化自根砧和矮化中间砧两种应用方式。自根砧多采用扦插和压条两种形式，其方法可参照育苗部分。矮化中间砧育苗是首先在实生砧上嫁接矮化砧或半矮化砧（中间砧），然后再在中间砧上面嫁接优良品种。苹果矮化中间砧苗由品种接穗、矮化中间砧、基砧3部分组成。基砧根系发达，固地性、抗性、适应性强，采种繁殖容易。生产中多用山定子和海棠作基砧，中间砧则采用M系砧木或马克等矮化砧木或半矮化砧木。矮化中间砧苗木的常规培育过程是：选择当地适宜的苹果实生砧木做基砧，当年秋季在实生苗近地面处嫁接矮化砧木做中间砧；翌年春季剪砧后促使矮化中间砧萌发，秋季再于矮化中间砧枝段的20～30cm处嫁接苹果品种接穗；第三年春季剪砧促使品种接芽萌发，培养培育矮化中间砧成苗。采用这种办法，从播种到成苗，一般需要3年时间。为加快育苗效率，生产中多采取二重枝接或分段芽接方法培育矮化中间砧苹果苗木。二重枝接法一般是利用二年生留圃基砧进行。在春季萌芽前先将品种接穗（芽）嫁接到中间砧上，再将中间砧和品种组合（中间砧长度一般为20～30cm）采用枝接法嫁接到基砧上。分段芽接法即在中间砧采穗圃或常规育苗圃，于秋季在中间砧枝条上，按30～40cm的间距，嫁接品种接芽，第二年春季，将已嫁接品种接芽的中间砧枝段嫁接到基砧上。采用这两种方式可以使矮化中间砧苗木的育苗时间缩短1年。
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