化合物纯度溶剂溶解度检测MedChem

产品检测方法一般有核磁共振氢谱(HNMR)，液质联用(LCMS)，高效液相色谱(HPLC)。我们一般通过核磁共振确定结构式(产品是否正确)和大概纯度(是否含杂质及杂质大概比例)，通过LCMS或HPLC测定确定产品具体纯度(产品需要有紫外吸收)。■核磁共振(NMR)核磁共振(Nuclearmagneticresonance)，简称NMR，是磁矩不为零的原子核，在外磁场作用下自旋能级发生塞曼分裂(Zeemaneffect)，共振吸收某一定频率的射频辐射的物理过程。核磁共振波谱学是光谱学的一个分支，其共振频率在射频波段，相应的跃迁是核自旋在核塞曼能级上的跃迁。主要用于鉴定分子的结构，样品的纯度。NMR常用的溶剂：一些小极性的化合物(脂肪长链的，脂肪环的)一般用chloroform做溶剂，甾体类的化合物多用氘代吡啶做溶剂。核磁检测常用氘代溶剂有：D2O，氘代丙酮，氘代DMSO，Chloroform-d，氘代甲醇，氘代苯，氘代乙*，氘代吡啶等。我们的产品中一些盐、大极性的化合物可以选用氘代DMSO，重水，氘代甲醇做溶剂。核磁共振氢谱(HNMR)：HNMR是用来测定分子中H原子种类和个数比的。HNMR中，峰的数量就是H的化学环境(即H的种类)的数量，而峰的相对高度，就是对应的处于某种化学环境中的H原子的数量，不同化学环境中的H，其峰的位置是不同的。例：CH3CH2OH中，有3种H，则有3个峰，强度比为：3:2:1。CH3OCH3中，只有一种H，则有1个峰。CH2=CH-CH3中，有三种H，个数比为：2:1:3。

乙醇(CH3CH2OH)的HNMR

核磁氢谱谱图解析：1、产品结构式，分子式及分子量，通过分子式判断H原子总数；2、H原子化学位移，体现的是H原子种类，化学位移单位为ppm；3、样品检测用的氘代试剂溶剂峰；4、氘代试剂中的水峰；5、不同化学位移情况下H原子个数分布，个数总和与结构式中化学式中H原子个数12H一致，化学位移11.05ppm为活泼H，积分值可能不足1；6、谱图右侧为检测参数，包括仪器信息，检测温度，扫描次数等。■LCMS检测质谱(MS)是用电场和磁场将运动的离子(带电荷的原子、分子或分子碎片，有分子离子、同位素离子、碎片离子、重排离子、多电荷离子、亚稳离子、负离子和离子－分子相互作用产生的离子)按它们的质荷比分离后进行检测的方法。测出离子准确质量即可确定离子的化合物组成。质谱是纯物质鉴定的最有力工具之一，其中包括相对分子量测定、化学式的确定及结构鉴定等，具有灵敏度高，样品用量少，分析速度快，分离和鉴定同时进行等优点。质谱一般与高效液相色谱(HPLC)或气相色谱(GC)联用，对样品组分分离，分别测定各组分的分子量与百分比。与高效液相色谱(HPLC)联用，称为LCMS(Liquidchromatography-massspectrometry)。LCMS谱图分析(高效液相HPLC与质谱MS联用)：1、LCMS第一/二个曲线图，为检测器DAD紫外吸收高效液相HPLC图，检测波长一般是nm/nm，可作为纯度参考；2、第三个曲线图，为MS信号流，显示MS信号强弱，可能因信号噪音出现基线不平现象，不作为纯度参考；3、第四个曲线图，为提取的含目标产品MS信号图，有出峰表示有目标产品，无出峰表示无目标产品；4、MS质谱图，MS信号显示目标分子量M+1峰，或M+Na峰，以及电离产生的碎片离子峰。质谱MS分析：横坐标是质荷比，即离子的质量和质子所带的电荷之比。纵坐标是离子流的强度，最高峰为基峰。1、一般MS图谱中的分子离子峰的值应为EM+1(ExactMass)，即[M+H]+，例如醚、酯，胺、酰胺、*化物、氨基酸酯等；2、常见的加合离子有[M+Na]+，[M+K]+，[2M+H]+，[2M+Na]+，[M+H]/2+等；3、加有缓冲溶液或溶剂的体系还可引进[M+X+H]+，(X=溶剂或缓冲溶液中的阳离子)如：用碱性体系方法分析时常见的加合离子有[M+NH4]+(如碱性体系用的铵盐缓冲溶液)；4、负离子检测时，一般MS图谱中的分子离子峰的值应为EM-1(ExactMass)，即[M-H]-；加有缓冲溶液或溶剂的体系还可引进[M+X-H]-，(X=溶剂或缓冲溶液中的阴离子)。■高效液相色谱HPLC高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。根据流动相和固定相相对极性不同，液相色谱分为正相色谱(NP-HPLC)和反相色谱(RP-HPLC)。RP-HPLC，可分离产品与杂质，一般用于纯度测定。NP-HPLC是采用极性固定相(如带有二醇基、氨基、和*基的固定相及硅胶、三氧化二铝等)、非极性流动相(如正己烷等)的分离方法。这是一种根据分子的极性大小将其分开的液相色谱技术。我们一般用于手性异构体的纯度测定，如ee(enantiomericexcess)值和de(Diastereomericexcesses)值，也就是手性HPLC。手性HPLC检测需要对映异构体，消旋体，或非对映异构体进行定位对照检测。反相RP-HPLC一般作为纯度检测：黑色曲线为空白对照，蓝色曲线为样品检测液相图，Rel.Area(相对峰面积)为纯度。正相NP-HPLC一般用于手性纯度，ee值或de值检测。以上是我们常规的检测方法。针对不同的产品，我们根据结构性质来选择合适的方法，包括是否有紫外吸收，是否含手性中心，不同溶剂溶解性如何等等。部分产品如金属络合物、聚合物、无机盐等不适合以上常规方法检测，可以参考相关文献测定红外、紫外吸光度、滴定或者选择其它检测方式。